A 色譜柱驗收
檢查外觀是否完好；
檢查柱子的規(guī)格型號，是否與您的需求相符；
如果您想對新色譜柱的性能進行測試，可以按照柱性能測試報告上的條件進行測試。
B 色譜柱安裝
該色譜柱與外徑為1/16英寸的PEEK管線或不銹鋼管線好匹配；
為減小死體積，柱前和柱后的管線內(nèi)徑應(yīng)不超過0.01 英寸(0.25 mm)；
如果您使用的是PEEK管線，您應(yīng)選擇PEEK接頭使管線與色譜柱連接；如果您使用的是不銹鋼管線，您可以選擇PEEK接頭或不銹鋼接頭，當(dāng)使用不銹鋼接頭時，應(yīng)確保管線與柱頭緊密結(jié)合后再固定韌環(huán)，這樣可以防止管線與色譜柱連接處產(chǎn)生死體積。
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C 流動相使用指導(dǎo)
該反相色譜柱，可以使用水或有機溶劑作為流動相，并且為了特殊需要還可以在流動相中加入酸、堿、鹽；
該色譜柱能夠耐受0%-100%有機相；
該色譜柱的pH值耐受范圍為1.5-10.0，流動相的pH值不應(yīng)超過這一范圍，否則色譜柱性能和壽命會受到影響；
對于混合流動相，應(yīng)確保不同溶劑間的良好互容；
對于有機溶劑-緩沖溶液體系，應(yīng)確保緩沖鹽不會析出；
不同流動相的黏度有差別，使用不同的流動相時，色譜柱產(chǎn)生的壓強會有差別；使用水(包括緩沖溶液)-乙腈體系時，乙腈含量為20%時產(chǎn)生的壓強*大；使用水(包括緩沖溶液)-甲醇體系時，甲醇含量為50%時產(chǎn)生的壓強*大；Platisil(鉑金)系列色譜柱的*高承受壓強遠(yuǎn)高于反相模式下可能產(chǎn)生的*高壓強；
在10-40 °C之間，使用較高的柱溫能夠降低色譜柱壓強并改善分離效果；
用于流動相配制的溶劑應(yīng)為HPLC級或更高級別，作為添加物的酸、堿、鹽盡量使用HPLC級別；
色譜柱入口和出口安裝了2 μm篩板，為避免色譜柱堵塞，流動相應(yīng)經(jīng)0.45 μm濾膜或孔徑更小的濾膜過濾；
流動相應(yīng)該有效脫氣后再使用，以避免在系統(tǒng)中產(chǎn)生氣泡導(dǎo)致的泵和檢測器不穩(wěn)定；
純水或緩沖鹽水溶液易滋生微生物造成流動相污染，純水或緩沖鹽水溶液作為流動相組分時，24小時內(nèi)應(yīng)更換新的溶液。
D 轉(zhuǎn)換流動相的注意事項
您收到的色譜柱是保存在65%乙腈水溶液中的，使用前建議您用甲醇或乙腈對新色譜柱進行活化沖洗；
純有機溶劑或有機溶劑含量較高的流動相與含緩沖鹽的流動相變換，不應(yīng)直接替換，兩者之間應(yīng)使用10%甲醇水溶液或10%乙腈水溶液進行過渡，過渡溶劑體積不少于10倍柱體積；
用某一種流動相代替上一種流動相時，應(yīng)確保兩者互容。
E 色譜柱保存
超過24小時的時間不使用色譜柱，*好將色譜柱保存在乙腈或甲醇中；
操作時的流動相中若無酸、堿、鹽，可以用乙腈或甲醇沖洗20倍柱體積后直接封存；操作時的流動相中若有酸、堿、鹽，應(yīng)先用10%甲醇水溶液或10%乙腈水溶液沖洗20倍柱體積，然后再用乙腈或甲醇沖洗，然后封存；
使用隨色譜柱一起的PEEK螺旋塞將色譜柱的入口和出口密封，以防止柱中溶劑揮發(fā)。
F 對樣品的要求
用于進樣的樣品溶液須經(jīng)0.45 μm濾膜或孔徑更小的濾膜過濾；
如果樣品提取自復(fù)雜基質(zhì)(比如動植物基質(zhì))，*好對提取液進行適當(dāng)?shù)募兓幚恚员苊馕廴旧V柱，影響分析效果和色譜柱壽命；
安裝保護柱可以防止顆粒物堵塞色譜柱，并預(yù)先吸附強保留物質(zhì)，以避免其污染色譜柱。
G 色譜柱再生方法
當(dāng)色譜柱壓強明顯升高時可對色譜柱進行再生處理。用相當(dāng)20倍柱體積的溶劑按下列次序沖洗色譜柱：10％甲醇水溶液→甲醇→異丙醇→甲醇。該程序適用于反相色譜柱：C18, C8, PH, CN。如果色譜柱的壓力升高是由顆粒雜質(zhì)堵塞引起，再生處理效果不明顯。
柱床體積計算方法V=3.14*d2*L/4
d為色譜柱內(nèi)徑，單位為cm；L為柱長，單位為cm。
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